زمینه و هدف: بر اساس یافته های مطالعات همه گیرشناسی 85-60% زنان یائسه از علائم وازوموتور یائسگی از جمله گرگرفتگی، عرق شبانه رنج می برند. درمان های دارویی و هورمونی عوارض ناخواسته و احتمال افزایش سرطان را به دنبال داشته است. هدف مطالعه حاضر تعیین اثربخشی مراقبه شکرگزاری بر علائم وازوموتور یائسگی است. روش کار: این مطالعه طرحی نیمه آزمایشی با پیش آزمون، پس آزمون و پیگیری است. نمونه ها از جامعه زنان 55-45 ساله مراجعه کننده به مراکز بهداشتی-درمانی شهر تنکابن با یائسگی طبیعی که حداقل 12 ماه تمام از یائسگی آن ها گذشته و دارای معیار های ورود به مطالعه و رضایت نامه آگاهانه بودند و پس از غربالگری اولیه از طریق پرسشنامه سلامت عمومی "گلدبرگ" به تعداد 30 نفر انتخاب و سپس به طور تصادفی در دو گروه (15 نفری) آزمایش و کنترل در مطالعه مشارکت داشتند. گروه مراقبه شکرگزاری به مدت 8 هفته در برنامه آموزش بر اساس دستورالعمل مراقبه "گرینبرگ" و الگوی شکرگزاری اسلامی اصفهانیان و همکاران (جلسات 2 ساعت گروهی هفته ای یک بار و تمرین انفرادی 25 دقیقه ای هرشب قبل از خواب) قرار گرفتند و گروه کنترل درمانی دریافت نکرد. برای تحلیل داده ها از نرم افزار SPSS نسخه 22 استفاده شد. یافته ها: نتایج تحلیل واریانس با اندازه گیری مکرر نشان داد، مراقبه شکرگزاری در گروه آزمایش با کاهش دفعات و مدت زمان علائم وازوموتور پس از مداخله رابطه معنی دار (05/0p>) و پایداری تا مرحله پیگیری داشته است. نتیجه گیری: بر اساس نتایج مطالعه حاضر می توان از مراقبه شکرگزاری در برنامه مراقبت از زنان یائسه و کاهش علائم وازوموتور آن ها در جوامع مشابه استفاده کرد.

هدف: در اکثر تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی نیاز به ساخت سازه ژنی می باشد. برای ساخت و تکثیر این سازه ها اغلب از پلاسمیدهای تجاری موجود استفاده می شود. گاهی اوقات به علت متعدد بودن قطعات ژنی و طولانی بودن این قطعات و محدودیت در استفاده از آنزیم ها، استفاده از پلاسمیدهای موجود سبب افزایش هزینه و زمان پروژه می شود. در مواردی نیز ساخت سازه ژنی با استفاده از پلاسمیدهای موجود امکان پذیر نمی باشد. در این تحقیق با استفاده از یک روش ساده و سریع پلاسمید مطلوب برای پروژه ژن درمانی بتا تالاسمی طراحی و ساخته شد. روش مطالعه: در ابتدا با بررسی قطعات سازه ژنی با نرم افزارGene runner، مولتیپل کلونینگ سایت مطلوب طراحی و سنتز شد. از طرفی سایت متعدد کلونینگ پلاسمید pUC19 با هضم آنزیمی از پلاسمید خارج شد. سپس در طی یک واکنش لایگشن و ترانسفورمیشن، سایت متعدد کلونینگ جدید جایگزین سایت متعدد کلونینگ پلاسمید pUC19 شد و با آنالیز آنزیمی و تعیین توالی صحت کار تایید شد. یافته ها: ارزیابی ها، مراحل طراحی و ساخت سایت متعدد کلونینگ را موفقیت آمیز نشان داد. درمرحله ترانس فورمیشن نیز کلنی های متعدد حاصل شد. اغلب آنها در مرحله هضم آنزیمی تایید شدند. یکی از کلنی های تایید شده تعیین توالی شد و مورد تایید نهایی قرار گرفت. نتیجه گیری: روش مورد استفاده در این تحقیق روش ساده، ارزان و سریع جهت ساخت پلاسمیدهای مطلوب از پلاسمیدهای تجاری موجود است. این کار سبب کاهش هزینه و زمان پروژه های ساخت سازه ژنی می شود. سایت متعدد کلونینگ به گونه ای طراحی گردید تا تمام قطعات بصورت جهت دار کلون شوند. این امر باعث حذف مراحل تعیین جهت و افزایش کارآمدی مراحل کلونینگ می شود.

هدف: بررسی تاثیر همراهی پلاسمید کدکننده Bax در افزایش کارآیی DNA واکسن پلاسمید gB ویروس هرپس سیمپلکس نوع یکمواد و روش ها: در این تحقیق 3 دوز از پلاسمید کدکننده (pcbax) Bax شامل مقادیر 10، 25 و 50 میکروگرم به همراه پلاسمید کدکننده ژن گلیکوپروتیین (pcgB) B ویروس هرپس سیمپلکس تیپ یک  (HSV-1)به طریق داخل جلدی و به طور هم زمان به موش های C57BL/6 تزریق شد تا افزایش پاسخ های ایمنی و حفاظت حیوانات فوق در مواجهه با ویروس کشنده HSV-1 بررسی شود. پاسخ های ایمنی نسبت به آنتی ژن فوق با روش های پاسخ پرولیفراسیون لنفوسیتی و اندازه گیری سایتوکاین های INF-g و IL-4 ترشح شده بررسی شدند.یافته ها: نتایج نشان داد موش هایی که 25 میکروگرم pcbax را به همراه pcgB دریافت کرده بودند حفاظت موثرتری نسبت به موش هایی که 50 میکروگرم pcbax را با pcgB دریافت کردند، نشان دادند. آنالیز پاسخ های ایمنی سلولی نیز نشان داد موش هایی که با 25 میکروگرم pcbax و pcgB ایمونیزه شدند پاسخ های پرولیفراسیون لنفوسیتی قوی تری و نیز سطوح اینترفرون گاما (INF-g) و اینترلوکین 4 (IL-4) بیشتری نسبت به موش هایی که 10 و 50 میکروگرم pcbax و pcgB دریافت کرده بودند، نشان می دهند.نتیجه گیری: این نتایج نشان می دهد ایمن زایی هم زمان pcgB و 25 میکروگرم pcbax منجر به افزایش پاسخ های ایمنی نسبت به حالتی است که از 10 و 50 میکروگرم pcbax و pcgB استفاده شود. نتایج فوق می تواند امیدی در جهت دست یابی به روشی موثر در ارتقا بخشیدن به واکسن DNA علیه HSV-1 و یا سایر پاتوژن ها باشد.

سابقه و هدف: کنسر تستیس آنتی ژن ها دست های از آنتی ژن ها می باشند که به طور ویژه بیان آن ها در سلول های زایا و انواع مختلفی از سرطان ها دیده شده است. یکی از اعضای این خانوادهMAGEA4  می باشد که این آنتی ژن با انواع تومورها در ارتباط است. از آنجا که عملکرد این ژن هنوز به درستی مشخص نشده است، هدف از این مطالعه تکثیر و کلونینگ این ژن در وکتور بیانی به منظور تولید پروتئین نوترکیب بیان کننده MAGEA4 است.مواد و روش ها: از طریقPCR  و با استفاده از پرایمرهای اختصاصی حاوی برش آنزیم محدود کننده ژن MAGEA4 تکثیر شد. محصول PCR خاص شده بین سایت های BamH1 وXho1  وکتور pTZ57/R قرار گرفت و در سویه Top10 اشرشیاکلی ترانسفورم گردید و توسط IPTG وX-Gal  غربالگری شد. صحیح قرا گرفتن قطعه MAGEA4 توسط برش آنزیمی و تعیین توالی بررسی گردید. سپس ساب کلونینگ این ژن در وکتور بیانی pRUF با همان جایگاه های برش آنزیمی صورت پذیرفت.یافته ها: تایید نهایی از طریق PCR کلنی و برش آنزیمی، تعیین توالی صورت گرفت. بنابراین ژنMAGEA4  در جایگاه برشی آنزیمی پلاسمید pRUF کلون شد.نتایج: مطالعه حاضر گام مهمی جهت تولید پروتئین نوترکیب و استفاده از آن جهت پی بردن به عملکرد این ژن و اهداف درمانی به منظور درمان سرطان می باشد.

زمینه و هدف: با استفاده از ایمونوگلبولینها می توانیم اطلاعات دقیقی در مورد یک آنتی ژن خاص بدست آوریم. برای جداسازی اختصاصی یک کلاس ایمونو گلبولین ازروش کروماتوگرافی جذبی استفاده می شود. هدف این مطالعه تهیه پروتئین A نوترکیب باکتری استافیلوکوکوس اورئوس بوده که در کروماتوگرافی جذبی برای جداسازی IgG سرم استفاده میگردد.روش بررسی:  DNAژنومی باکتری استافیلوکوکوس اورئوس استخراج گردید و بکمک پرایمرهایی که بر اساس ژن پروتئین A طراحی شده بودند واکنش PCR انجام گرفت و محصول  PCRدر پلاسمید کلون شد. برای جدا کردن ژن فوق پلاسمید نوترکیب با انزیم های NdeI و EcoRI هضم گردید. ژن پروتئینA  خالص سازی گردید و در پلاسمید بیانی ساب کلون شد.یافته ها: ژن پروتئین A با روش PCR تکثیر شد. محصولPCR  که دارای 1435 نوکلئوتید می باشد با موفقیت در پلاسمید بیانی کلون و تایید گردید.نتیجه گیری: پلاسمیدنوترکیب برای بیان پروتئین نوترکیب و استفاده درستون کروماتوگرافی جذبی مخصوص جداسازی IgG سرم آماده میباشد.

زمینه و هدف: روتاویروسها عامل گاستروآنتریت کودکان زیر 5 سال هستند و سالانه موجب حدود 800000 مرگ می شوند. افزودن واکسن روتاویروس در برنامه ایمن سازی کودکان می تواند باعث کاهش قابل ملاحظه مرگ و میر کودکان به خصوص در کشورهای درحال توسعه شود. پروتئین VP4 خار کپسید خارجی روتاویروس بوده که روتاویروس توسط آن به گیرنده خود متصل می شود. پروتئین VP4 موجب تولید آنتی بادی خنثی کننده می شود. با در نظر گرفتن موارد فوق ما، ژن VP4 روتاویروس را در پلاسمید به منظور بیان VP4 در آینده کلون کردیم. روش بررسی: سلول BSC-1 به صورت تک لایه کشت داده شد. وقتی کشت سلولی CPE کامل روتاویروس را نشان داد سه مرتبه ذوب و فریز شد. روتاویروس توسط اولتراسانتریفیوژ نسبتا خالص گردید. پرایمرهای اولیگونوکلئوتیدی مخصوص قطعه 4 ژنوم روتاویروس که VP4 را کد می کند ساخته شد. ژنوم RNA ویروس استخراج و به عنوان الگو برای ساخت cDNA توسط ترانس کریپتاز معکوس استفاده گردید. سپس به وسیله  PCRتکثیر داده و محصول PCR در ناقل پلاسمید کلون شد. پلاسمید حاصل با آنزیمهای محدودالاثر و تعیین توالی مورد تحلیل قرار گرفت.یافته ها: نتیجه تعیین توالی به وسیله نرم افزار BLAST تحلیل شد که %100 با توالی قطعه شماره 4 روتاویروس موجود در بانک NCBI ژنی مشابه بود. نتیجه گیری: نتیجه تحلیل توالی تایید می کند که نوکلئوتیدهای ژن VP4 بعد از پاساژهای طولانی روتاویروس SA11 در آزمایشگاه ما ثابت مانده است.

هدف: در بیان عامل تحریک کننده رده گرانولوسیت - ماکروفاژ انسانی (hGM-CSF)، در اشریشیاکلی تحت القای حرارتی، بر پایه پلاسمید pBC(SK)، که اختلاف آن ها در حضور یا عدم حضور توالی خاتمه دهنده نسخه برداری در پایین دست توالی کد کننده است پروتئین نوترکیب، ساخته شد.مواد و روش ها: دو پلاسمید بیان کننده حاوی یک قطعه 75 جفت بازی از پروموتور باکتریوفاژی λPL، یک ژن جهش یافته از رپرسور (CI857) CI، برای کنترل فعالیت پروموتور، که محصول آن حساس به حرارت است و یک ترادف نشانه PelB به منظور هدایت پروتیین نوترکیب به فضای پریپلاسمی است. توانایی پلاسمیدهای ساخته شده با بیان hGM-CSF تحت القای حرارتی در اشریشیاکلی آزمایش شده است.نتایج: نتایج حاصل از آنالیز پروتئین های باکتری های نوترکیب (TG1) حاوی هر یک از دو پلاسمید نوترکیب بعد از شوک حرارتی بر بیان و پردازش کامل GM-CSF انسانی نوترکیب در فضای پریپلاسمی کلون های به دست آمده دلالت دارد. با هدف افزایش کاربری پلاسمید حاوی خاتمه دهنده رونویسی برای بیان دیگر پروتئین های نوترکیب تحت القای حرارتی، توالی کلون سازی چندگانه ای (MCS) شامل یازده جایگاه برشی منحصر به فرد به این پلاسمید افزوده شد.نتیجه گیری: پلاسمیدهای ساخته شده در این تحقیق ابزارهای مناسبی را برای انجام مطالعات مربوط به بیان پروتیین های نوترکیب در اشریشیاکلی فراهم کرده اند.

لطفا برای مشاهده چکیده به متن کامل (pdf) مراجعه فرمایید.

لطفا برای مشاهده چکیده به متن کامل (PDF) مراجعه فرمایید.